立博国际，立博官网，立博国际官网，立博指数，立博威廉，立博球探，立博论坛，立博网址-配制用水温度对2216E液体培养基灭菌后沉淀量的影响

一、培养基简介：

  该培养基用于海生细菌的增菌培养，由蛋白胨、酵母粉、柠檬酸铁、氯化钠、氯化镁、硫酸钠、氯化钙、氯化钾、碳酸钠、溴化钾、氯化锶、硼酸、硅酸钠、氟化钠、硝酸铵和磷酸氢二钠组成。

  培养基含有较为丰富的无机盐成分，在加热和灭菌的过程中很容易发生反应形成沉淀，是由于培养基中Ca²⁺、Mg²⁺、Fe³⁺等阳性离子与培养基中的可溶性磷酸盐共热沉淀，但不影响使用。建议配制培养基时使用去离子水、蒸馏水、纯化水，切勿使用普通自来水，引入更多的离子。在配制时，溶解培养基的水的温度对灭菌后沉淀的量也有很大影响。

  本次试验验证热水和冷水溶解培养基干粉对灭菌后沉淀量的影响。

二、试验方法：

  1. 热水溶解：量取纯化水至搪瓷缸中，加热煮沸，稍冷后，再将热水倒入烧杯（含磁力搅拌子）中，放置于磁力搅拌器上搅拌，缓慢加入干粉培养基，搅拌30min，再分装至试管（装量10mL）、三角瓶（装量200mL和装量400mL），高压灭菌，观察灭菌前后溶液的澄清度和沉淀物质的量。

  2. 冷水溶解：量取纯化水至烧杯（含磁力搅拌子）中，放置于磁力搅拌器上搅拌，缓慢加入干粉培养基，后续步骤同上。

三、试验结果：

  1. 灭菌前比较：搅拌溶解后发现，两种温度的水配制的培养基液体都是浑浊不澄清的，但热水培养基较冷水培养基偏浑浊，如图1所示。

图1 灭菌前热水和冷水溶解培养基的状态（装量从左到右分别是：400mL、200mL、10mL）

注：1-1：热水溶解；1-2：冷水溶解

  2. 灭菌后比较：两种温度的水配制的培养基在试管底部和三角瓶底部均有一层沉淀，仔细看的话是热水溶解的培养基底部沉淀相对多一些，结果如图2所示。

图2 灭菌后不同装量培养基的状态（左：热水，右：冷水）

注：2-1：400mL装量；2-2：200mL装量；2-3：10mL装量

四、配制含无机盐成分较多培养基的注意事项

  1. 在配制含无机盐成分较多的培养基时，应使用冷水溶解干粉，且应先加水再缓慢倒入干粉培养基，充分搅拌溶解，可以使用磁力搅拌器进行搅拌。

  2. 确保配制和分装培养基的容器清洁，避免杂质残留。

  3. 灭菌结束后尽快取出培养基，避免焖锅现象。

  4. 避免自行调节培养基pH值或者添加额外的营养成分，这些操作可能会导致离子之间发生复杂的化学反应，从而使培养基突然出现大量沉淀。

  5. 培养基灭菌后出现沉淀的原因可参考往期原创文章：培养基为什么会出现沉淀。

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