一、产品用途及原理:
该培养基用于假单胞菌,特别是铜绿假单胞菌的分离和增殖培养,主要作荧光素鉴别用。
胰酶解酪蛋白和胃酶消化动物组织提供微生物生长所需的碳源、氮源;甘油提供碳源;磷酸氢二钾为培养基pH缓冲剂;硫酸镁可促进绿脓菌素和荧光素的产生;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
Pancreatic Digest of Casein/胰酶解酪蛋白 |
10.0 |
Peptic Digest of Animal Tissue/胃酶消化动物组织 |
10.0 |
AnhydrousDibasic Potassium Phosphate/无水磷酸氢二钾 |
1.5 |
Magnesium Sulfate(MgSO4•7H2O)/硫酸镁 |
1.5 |
Agar/琼脂 |
15.0 |
pH值7.2±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品38.0g,加热溶解于1000mL纯化水中,加入甘油10mL,混匀,分装试管或三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,制成斜面或倾入无菌平皿,备用。
2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液,吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基和参比培养基(TSA);
3. 放置于恒温培养箱35℃±2℃需氧培养18h-72h,观察试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置35℃±2℃需氧培养18h-72h,试验结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
铜绿假单胞菌 |
ATCC 27853 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
绿色菌落,有荧光 |
铜绿假单胞菌 |
ATCC 9027 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
绿色菌落,有荧光 |
铜绿假单胞菌 |
CMCC(B) 10104 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
绿色菌落,有荧光 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
淡黄色菌落,无荧光 |
图1 质控菌株在假单胞菌琼脂培养基F(USP)上的生长情况
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