细菌的氨基酸脱羧酶试验需要覆盖液体石蜡,同时需以不含氨基酸的管做为对照管,氨基酸脱羧酶阳性的细菌会先分解试验管和对照管中的葡萄糖产酸,使培养基pH下降,颜色由紫色转为黄色,然后继续分解氨基酸产碱,使培养基的pH上升,颜色由黄色转为紫色,而对照管因没有氨基酸可以分解,因此保持黄色。所以在观察结果时,对照管黄色,试验管紫色,可判断氨基酸反应为阳性,试验管和对照管均为黄色则为阴性反应。但像铜绿假单胞菌这种氧化型细菌,并不能在厌氧条件下分解葡萄糖产酸,最终对照管和试验管都会是紫色,无法判断结果,本实验使用另一种配方的培养基测试立博国际,立博官网,立博国际官网,立博指数,立博威廉,立博球探,立博论坛,立博网址-铜绿假单胞菌的精氨酸双水解酶试验。
试验管配方(g/L) |
对照管配方(g/L) |
蛋白胨............1.0 |
蛋白胨............1.0 |
氯化钠............5.0 |
氯化钠............5.0 |
磷酸氢二钾.....0.3 |
磷酸氢二钾....0.3 |
酚红...............0.01 |
酚红..................0.01 |
L-精氨酸..............10.0 |
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pH:6.8±0.2 |
pH:6.8±0.2 |
原理:培养基以酚红为指示剂,pH在6.8±0.2,酚红显橙黄-橙红色色,接种细菌后无需覆盖液体石蜡。若细菌可分解精氨酸产碱,则试验管的pH上升,培养基会逐渐变红,而对照管没有精氨酸,颜色通常不会有明显改变,通过试验管与对照管颜色对比可判断细菌是否能分解精氨酸产碱。
图1:左1,左3,左5,左7,左9为试验管,左2,左4,左6,左8,左10为对照管,接种5株不同的铜绿假单胞菌,试验管均变为深红色,为阳性反应。
图2:左1,左3,左5,左7,左9为试验管,左2,左4,左6,左8,左10为对照管,分别接种大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、阪崎肠杆菌、奇异变形杆菌、普通变形杆菌,其中大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、阪崎肠杆菌试验管明显变红,为阳性反应,奇异变形杆菌、普通变形杆菌的试验管和对照管颜色一致,为阴性反应。
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