沙门氏菌参考检验方法
一、肠杆菌噬菌体分属诊断方法
1978~1986年间,由江西省卫生防疫站和南昌市医学科学研究所,共同建立了肠杆菌科分属诊断噬菌体,是供沙门氏菌属、志贺氏菌属、大肠埃希氏菌属,弗劳地氏柠檬酸杆菌和阴沟杆菌鉴定用的配套噬菌体(包括沙门氏菌噬菌体O-1,弗劳地氏柠檬酸杆菌噬菌体C(фⅠ和фⅢ)、噬菌体CE(фⅡ和E-3)、大肠埃希氏噬菌体E(E-1和E-2)、大肠埃希氏菌噬菌体E-4,阴沟肠杆菌噬菌体Ent)。
二、肠杆菌科分属诊断噬菌体应用于沙门氏菌诊断方法
(一)标本按常规方法进行前增菌和增菌后,划线接种于鉴别平板,于37℃培养过液,挑取可疑菌落于2mL胨水管内,使每毫升含菌约50~100万个。
(二)将备好的营养琼脂平板在37℃烘干表面水分,使具有较好的吸水性,用灭菌棉签将菌液在已烘干的琼脂平板上涂抹。
(三)待平板上菌液干后,用配有 号针头的滴管(每毫升约100滴)依次滴加噬菌体。其顺序为O-1,C,Sh,E,CE,E-4,Ent。
(四)平板稍干后于37℃培养6h和过夜,观察结果,按下表判定菌属。必要时做靛基质试验。
表3-9 肠杆菌科诊断噬菌体简化诊断表
序号 |
噬菌体裂解模式 |
判定结果 |
|
O-1 |
c |
sh |
e |
ce |
e-4 |
ent |
|
1 2 3 4 5 6 7 8 0 |
cl cl - - · - - - - |
- - cl - - - - (-) - |
- - - cl - - - · - |
- - - · cl - - - - |
- - (-) · · cl · - - |
- cl (-) · · - cl - - |
- - - - - - - cl - |
沙门氏菌属 沙门氏菌属(靛基质一) 大肠埃希氏菌(靛基质十) 弗劳地氏柠檬酸杆菌 志贺氏菌属,大肠埃希氏菌 大肠埃希氏菌 弗劳地氏柠檬酸杆菌,大肠埃希氏菌 大肠埃希氏菌 阴沟肠杆菌 噬菌体阴性菌株(用生化试验方法鉴定) |
注:CL融合性裂解;-不裂解;·裂解或不裂解;(一)很少菌体裂解。
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